亚健康状态免疫正常化策略采用混合自然杀伤

图6PBMC中PD-1表达的“亚健康个体”的鉴定。

（A）健康人外周血单个核细胞中CD3+PD-1+细胞的比例4%。对95名年龄50岁的人外周血单个核细胞进行了分析，其中16.84%的样本中CD3+PD-1+细胞比例4%。（B）健康人CD3+CD4+PD-1+细胞中CD3+CD4+T细胞的比例10%。在这95名个体中，9.47%的样本的CD3+CD4+PD-1+细胞比例10%。（C）健康人CD3+CD8+PD-1+细胞中CD3+CD8+T细胞的比例10%。在这95名个体中，37.9%的样本的CD3+CD8+PD-1+细胞比例10%。我们将CD3+PD-1+细胞/PBMC4%和CD3+CD8+PD-1+细胞/CD3+CD8+细胞10%定义为“亚健康个体”（4.21%）。

自体NKM细胞是亚健康个体免疫正常化重建的潜动力

NKM细胞是免疫细胞类型的混合物，包括Th细胞（抑制细胞毒性）和NK细胞（诱导细胞毒性）。我们想知道这些NKM细胞是否能在亚健康个体的免疫正常化中发挥更有效的功能。

我们招募了四名潜在的亚健康个体，治疗计划如图7A所示。每次治疗使用约20×个自体NKM细胞。在治疗前、第一次注射后和第三次注射后测量T细胞中PD-1的表达。在患者-M和患者-Z中，单次注射NKM细胞后，CD3+、CD3+CD8+和CD3+CD4+细胞中的PD-1表达可显著降低至正常水平（CD3+PD-1+细胞/CD3+细胞4%；CD3+CD4+PD-1+细胞/CD3+CD4+细胞10%；CD3+CD8+PD-1+细胞/CD3+CD8+细胞10%）（图7B，7C）。在患者J中，一次注射NKM细胞的效果不明显。三次注射NKM细胞后，CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+细胞中的PD-1表达最终下降至正常水平（图7D）。在患者C中，三次注射NKM细胞可降低CD3+细胞和CD3+CD8+细胞中的PD-1表达，但不降低CD3+CD4+细胞中的PD-1表达（图7E）。所有亚健康个体对治疗表现出良好的耐受性，未观察到副作用。

图7亚健康个体使用NKM细胞治疗的潜在免疫正常化。

（A）健康个体NKM亚细胞治疗计划。体检后，每次注射使用20–30×NKM细胞，一个疗程内注射三次，时间间隔为1个月。在第二次注射前进行NKM细胞治疗期间的疗效检测。在NKM细胞治疗结束后1个月进行最终疗效检测。（B–E）对四名亚健康个体免疫正常化的有效NKM细胞治疗。招募患者Z（B）、患者M（C）、患者J（D）和患者C（E）。在NKM细胞治疗前、治疗中和治疗后分别测量CD3+PD-1+细胞/PBMC和CD3+CD8+PD-1+细胞/CD3+CD8+细胞的比例。显示了P值。

总之，我们发现，采用自体NKM细胞进行三次治疗，可以降低PBMCs的PD-1表达，可以完成亚健康个体的免疫系统重建。

讨论

几十年来，研究人员一直致力于“增强/改善”免疫系统，以消除严重疾病（如癌症）的潜在风险。免疫细胞疗法的发展使这些概念成为现实。

本文介绍了一种利用NKM细胞进行潜在辅助治疗和预防癌症的安全有效的方法。我们鉴定了NKM细胞的组成，并在体外和体内研究了它们的细胞毒性。我们发现NKM细胞对K细胞或肝细胞癌细胞具有明显的细胞毒性[35]。然而，与癌症患者的癌细胞数量相比，能够到达癌区的NKM细胞数量相对较少，因此抗癌效果有限。虽然该研究队列比较稳定，且治疗效果不明显，但我们显示了NKM细胞治疗的潜在辅助抗癌功能。后者可能不如使用纯NK细胞治疗有效。尽管如此，由于其易于操作和安全性（发现的免疫相关副作用较少），我们认为NKM细胞疗法是癌症患者的有效辅助疗法，尤其是与手术相结合，以改善免疫反应和消除残留癌细胞。

最近，学者们提出癌症免疫治疗应该